GPC与光散射检测器联用测定琥珀酰明胶的绝对分子量

来源：东曹（上海）生物科技有限公司      分类：工作原理 2023-10-13 13:37:06 52阅读次数

琥珀酰明胶是通过明胶的琥珀酰化而得到的改性明胶，是临床使用最为广泛的血浆代用品之一，具有扩容和抗休克效果好、免疫源性低及无干涉凝血等优点。主要用于增加血容量，放置失血性休克，降低血液粘度，改善微循环，防止血栓形成等。

本应用将东曹HLC-8320GPC凝胶渗透色谱仪和LenS3光散射检测器联用，配合使用TSKgel G3000SWXL色谱柱对琥珀酰明胶样品的绝对分子量进行测定。

分析条件

仪器：HLC-8320GPC&LenS3

色谱柱 ：TSKgel G3000SWXL (7.8 mmI.D. × 30 cm, 5 μm)

流动相 ：磷酸盐缓冲液

流速 ：1.0 mL/min

进样量 ：100 μL

温度 ：室温

样品前处理

1）流动相配制：取磷酸二氢钾3.52 g (Mw 136) 12.9 mM、磷酸氢二钠 (Mw 141.959) 8.08 g，28.458 mM，加入2 L超纯水，超声溶解，使用0.22 μm孔径的亲水性过滤膜真空抽滤3遍。

2）样品制备：使用流动相将琥珀酰明胶注射液稀释成浓度约20 mg/mL的溶液，使用0.22 μm孔径，PES材质的亲水性针式过滤器过滤，得到待测样品溶液。

分析结果

图1  琥珀酰明胶多检测器测试谱图

（紫色曲线为示差 (RI) 检测器信号，蓝色曲线为90o角光散射 (RALS) 检测器信号）

图2 琥珀酰明胶的RI (紫色) &RALS (蓝色) 和分子量随流出时间曲线 (绿色) 

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