Copure MAX|果酱和原味蛋糕中胭脂虫红的测定
1.1、草莓果酱
称取2g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋紧盖子,摇匀,置于沸水浴中加热30min,取出冷却至室温后,振荡5min,超声5min,5000r/min离心5min,上清液转移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,从中准确移取25mL样液做为待净化液。
1.2、原味蛋糕
称取2g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋紧盖子,摇匀,置于沸水浴中加热30min,取出冷却至室温后,振荡5min,超声5min,10000r/min离心10min,上清液转移至100mL容量瓶中,残渣加入盐酸溶液(2.0mol/L),常温下,重复提取1次,合并2次提取液,用水定容至刻度,从中准确移取25mL样液做为待净化液。
活化:使用前依次用6mL甲醇、6mL水进行活化,保持柱体湿润;
上样:将待净化液过柱,弃去上样液;
淋洗:依次用12mL水和6mL甲醇淋洗,弃去淋洗液,抽干小柱;
洗脱:用6mL磷酸甲醇溶液(2%)进行洗脱,收集洗脱液,于40℃水浴下氮吹浓缩至近干,用磷酸水溶液(0.1%)定容至2mL,涡旋混匀1min,10000r/min离心5min,上清液过0.22μm亲水PTFE滤膜,上机。
仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000;
色谱柱:Commasil C18(4.6 х 150mm,5.0μm);
流动相:A:磷酸水溶液(0.1%),B:磷酸乙腈溶液(0.1%),洗脱梯度程序见表1;
柱温:40℃
流速:1.2mL/min;
检测波长:494nm;
进样量:20μL。
表1 梯度洗脱程序
表2 加标回收实验结果
图1:添加水平为0.04g/kg的原味蛋糕中胭脂红酸检测液相色谱图
2.2添加水平为0.02g/kg的草莓果酱中胭脂红酸检测液相色谱图
5.1、洗脱液建议氮吹至近干,然后用磷酸水溶液(0.1%)定容至2mL。
5.2、尼龙滤膜会对胭脂虫红有吸附,建议过亲水的PTFE滤膜。
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