高通量测序NGS助手—Feyond-F100荧光酶标仪-医疗器械网

高通量测序NGS助手—Feyond-F100荧光酶标仪

来源：杭州奥盛仪器有限公司分类：产品评测 2024-03-23 10:54:33 98阅读次数

文库的质量对于高通量测序（NGS）产出的数据质量至关重要，低估或高估文库质量都会严重影响测序的效果。目前，最常用的定量试剂，是以Picogreen为主要成分的荧光染料，当其与DNA双链结合后，才能发出荧光，且所产生的荧光在一定范围内与DNA浓度呈正比，从而起到对DNA样本的精准定量。

与这类试剂搭配最常见的仪器，应是荧光计和荧光酶标仪。常见的荧光计有Thermo的Qubit4和Qubit Flex，还有奥盛自有产品Fluo-200和Fluo-800，但荧光计的通量较少，最多只能做到8通道，若要同时进行8通道的样品检测，还需同时进行8通道的标品校准，非常浪费试剂。而选用荧光酶标仪作为检测工具时，虽然检测通量有所增大，但面临着标准曲线建立的问题，由于荧光染料受环境的影响较大，因此在每次进行样品检测时，都需要重新建立一条标准曲线，若标曲线性不够理想，还需重新配制标曲，增加实验负担。

奥盛Feyond-F100荧光酶标仪不仅可进行常规的细胞活性、GFP、RFP、ORAC、Ca²⁺流分析等荧光实验，新增的定量检测功能集荧光计的便利与酶标仪的高通量于一身，无需建立标准曲线，仅需校准标品点，即可实现96个样品的精确定量，最低检出限达0.1ng/uL（10uL样本量）。

特色功能

除常规荧光检测外，新增定量模式

图1 Feyond-F100主界面图

仅需布局两个标品点，即可完成曲线校准

图2 标准品校准界面

内置标曲，调用即可，也可自行建立曲线保存

图3 标准曲线界面

仅需输入样品体积，检测结果一目了然

图4 结果显示界面

性能优异

标品性能验证

将10ng/uL标品梯度稀释成8、6、4、2、1、0.4、0.2ng/uL。样本量为1uL或10uL时，Feyond-F100与Q的偏差均在10%以内。

表1 标准品检测结果

体积	样品类型	Q定量	Feyond-F100	差值	偏差
10	标品	0.189	0.1941	-0.0051	-2.7%
10	标品	0.378	0.3854	-0.0074	-2.0%
10	标品	0.982	0.9739	0.0081	0.8%
10	标品	1.93	1.9675	-0.0375	-1.9%
10	标品	4	4.0883	-0.0883	-2.2%
10	标品	5.94	6.0796	-0.1396	-2.4%
10	标品	7.78	7.8077	-0.0277	-0.4%
10	标品	10.2	10.0803	0.1197	1.2%
1	标品	1.03	1.095	-0.065	-6.3%
1	标品	1.92	1.997	-0.077	-4.0%
1	标品	4.1	4.12	-0.02	-0.5%
1	标品	6.18	6.043	0.137	2.2%
1	标品	8.14	7.895	0.245	3.0%
1	标品	10.5	10.059	0.441	4.2%

文库及核酸定量

在测试文库样本及cfDNA样本时，Feyond-F100与Q的偏差也可在10%以内。

表2 样品检测结果

体积	样品类型	Q定量	Feyond-F100	差值	偏差
1	文库	104	105.079	-1.079	-1.0%
1	文库	74.2	74.102	0.098	0.1%
1	文库	77.4	75.628	1.772	2.3%
1	文库	22.6	22.245	0.355	1.6%
1	文库	Out of range	148.53	/	/
1	文库	52.4	53.455	-1.055	-2.0%
1	文库	84.6	87.402	-2.802	-3.3%
1	文库	11.5	10.8	0.7	6.1%
2	cfDNA	0.456	0.482	-0.026	-5.7%
2	cfDNA	1.27	1.287	-0.017	-1.3%
2	cfDNA	0.625	0.622	0.003	0.5%
2	cfDNA	0.758	0.794	-0.036	-4.7%
2	cfDNA	1.45	1.522	-0.072	-5.0%
2	cfDNA	1.48	1.542	-0.062	-4.2%