1.产品描述

CDS Empore?EZdisk滤器式萃取盘用于从液体样品中对目标分析物进行固相萃取(SPE)。该产品可有效去除或最小化样品基质干扰物和其他干扰物，以在分析前“净化”样品。此产品还可以富集目标分析物以达到分析方法所需的灵敏度范围。用户可通过选择吸附剂化学成分和适当的萃取方法非常方便地将目标化合物从复杂混合物样品中分离出来。EZdisk滤器式萃取盘内部的滤芯由三层特制膜片组成。滤芯中间是一层含有色谱级吸附剂颗粒的吸附膜。滤芯上下两侧为0.45μm预过滤膜片（PP材质），可改善具有挑战性（含有固体颗粒物）样品基质的流动性及有效减少吸附剂颗粒的流失量。除由PTFE和吸附剂颗粒组成的吸附膜外，该高性能萃取装置的其它所有组件均由聚丙烯（PP）制成。

2.颗粒负载膜技术

取得专利的CDS Empore?膜片生产工艺，将松散的SPE吸附剂颗粒转化为薄的、载有颗粒的膜片。这些膜片由在惰性PTFE纤维基质中紧密结合在一起的吸附剂颗粒（例如键合SiO2，C2、C8、C18和混合相阳离子以及各种共聚物）组成。PTFE原纤维不干扰颗粒的活性。Empore?膜片在实现吸附剂颗粒分布均匀的密集堆积方面是独一无二的。这种特殊的膜片技术最大限度地减少了目标分析物洗脱过程中吸附剂颗粒的流失。

标准密度(SD)和高密度(HD)规格（均值）

Empore?EZdisk滤器式萃取盘

*树脂吸附剂不提供SD格式

4.产品选择

在开发使用Empore?EZdisk滤器式萃取盘的固相萃取方法时，需做出许多选择。这些选择涉及因素包括：

（1）吸附剂颗粒密度

（2）萃取盘尺寸

（3）吸附剂化学

以下一般信息旨在让您熟悉在选择Empore?EZdisk滤器式萃取盘时可用的选项。

（1）吸附剂颗粒密度

Empore?EZdisk滤器式萃取盘提供标准密度(SD)和高密度(HD)吸附剂颗粒膜片两种格式。SD和HD吸附剂颗粒膜片配方均具有相同的特征，即均匀的颗粒分布和密集堆积，但在颗粒尺寸和膜厚度方面有所不同。

标准密度（SD）颗粒膜片适用于生物基质样品，推荐作为大多数应用的首选。高密度（HD）颗粒膜片适用于需要更小洗脱体积以及样品基质相对干净（例如水或过滤血清）的情况。

（2）萃取盘尺寸

Empore?EZdisk滤器式萃取盘尺寸由滤芯直径定义。目前，有两种Empore?EZdisk滤器式萃取盘滤芯尺寸可供选择，分别为13mm和25mm。选择滤器式萃取盘尺寸通常取决于三个因素：(a)样品体积(b)样品粘度(c)洗脱体积要求。EZdisk滤器式萃取盘选型的一般指南如下所示。

13mm EZdisk滤器式萃取盘

- 0.5mL至1000mL样品体积的理想选择。

- 可使用自动化设备提高样品通量

- 洗脱体积小，范围为0.5mL-5mL*

- 推荐使用正压装置处理

25mm EZdisk滤器式萃取盘

- 最常用和通用的尺寸

- 更高的样品容量

- 由于更大的萃取盘表面积而具有快速流动特性

- 通常用于5mL至1000mL以上的样品体积。

- 可使用自动化设备提高样品通量

- 洗脱体积范围为0.5mL-6mL*。

*洗脱体积会因目标分析物、其对所选吸附剂的亲和力以及洗脱溶剂的强度而异。

（3）吸附剂化学

理想的萃取过程需要目标分析物的物理化学特性（pKa；酸性、中性或碱性特性；官能团）与吸附剂化学及其固体载体（硅胶或共聚物）紧密匹配。在许多情况下，该过程中采用相同的基质和化学环境（pH值和/或盐浓度）非常重要。

使用键合硅胶进行反相萃取

反相萃取是最常见的SPE类型。在这种情况下，脂肪烃链（例如C18、C8或C2）键合到不规则形状的硅胶颗粒上。目标分析物通过非极性相互作用、范德华力或二次相互作用（例如，与硅胶表面硅烷醇的氢键）的组合保留。

使用SDB共聚物进行反相萃取

用于反相萃取的键合硅胶吸附剂的常用替代品是基于聚（苯乙烯二乙烯基苯）的共聚物。与键合硅胶吸附剂相比，该共聚物吸附剂具有以下优点：

没有二次相互作用

无pH范围限制

更大的吸附容量

提高了对中等极性的选择性，

可接受水溶性分析物

使用键合硅胶的混合相萃取

混合相阳离子(MPC)吸附剂是一种硅胶基颗粒，结合了反相基团（C8）和强阳离子交换基团（苯磺酸）。与传统的反相技术相比，这种混合相化学存在两种主要的吸附模式，并且优化了pH值以实现最大的分析物保留，从而可以更有效和选择性地提取碱性药物。

五个基本步骤：

1.活化填料

2.加载和提取样品

3.淋洗干扰物

4.洗脱分析物

5.准备洗脱液进行分析

1. 活化填料

必须首先通过添加甲醇（或乙腈）润湿反相吸附剂。使大部分甲醇穿过填料，但需使膜片表面保持湿润。通过添加去离子水去除残留的甲醇。使大部分水通过膜片，但保持膜片表面湿润。使液体通过膜片的常用处理方法（真空、正压、自动化液体处理工作站）在样品处理选项部分有进一步说明。

注意：重要的是在加载样品之前不要让膜片干燥。如果膜片确实变干，请重复活化过程。

2. 加载和提取样品

根据方法的需要添加内标(IS)和/或调整样品的pH值。必要时可使用等体积的缓冲液稀释样品，从而提高流动性。最后，将样品转移到EZdisk滤器式萃取盘上样管中。

3. 淋洗干扰物

上样后淋洗步骤的目的是去除可能干扰后续分析的共萃取物质。水和缓冲液通常用作反相萃取的淋洗溶剂。它们可有效去除吸附剂床表面上残留的干扰物。建议在上样后首先使用水洗，而不是仅使用单一的有机溶剂水混合物。

注意：单独使用水或缓冲液可能无法在每次检测中提供足够的净化效果。应选择二次淋洗，使其尽可能多地去除干扰物质，而不会对目标分析物的保留产生不利影响。第二次淋洗应包含少量有机溶剂（在水性混合物中通常为5%至20%的有机溶剂），以更有效地去除潜在的干扰物质。在执行洗脱步骤之前尽可能多地去除残留的淋洗溶剂。

4. 洗脱分析物

使用干净的样品收集管或样品瓶进行分析物洗脱。注意：萃取盘的填料床体积允许减少洗脱体积（较散装填料SPE柱）。向萃取盘上样管中加入适当体积的必要洗脱溶剂（参见体积指南部分）。使洗脱溶剂通过萃取盘。添加第二个等份溶剂，并重复洗脱。分析前涡旋混合洗脱液，使其均匀。

5. 准备洗脱液进行分析

以小体积溶剂洗脱萃取盘的操作，意味着可以省略浓缩步骤。如果洗脱液是LC流动相或与其互溶的溶剂，则不需要额外的步骤（请参阅浓缩步骤部分）。如果使用有机溶剂进行洗脱，并且需要进一步浓缩样品以达到测定的检测限，则典型的程序包括在氮气下浓缩洗脱液（有时加热）。然后通过将已知体积的适当溶剂（与仪器分析兼容）添加到收集管中定容并在分析前涡旋混合。

1.反相萃取

与传统填料式SPE产品相比，Empore?膜式萃取盘中吸附剂的质量较小，因此可以使用更小的溶剂体积。下表列出了使用反相吸附剂萃取盘的SPE方法溶剂体积一般指南。在选择最佳淋洗溶剂组合物（如示例中所示的10%甲醇并非对所有测定而言都是最佳的）和特定洗脱溶剂（通常为甲醇或乙腈）方面，每种条件都需要进一步优化。

重要提示：建议优化洗脱溶剂的体积，以确保使用能够从吸附剂相中重现性地洗脱分析物的最小体积。由于破坏离子相互作用可能比反相相互作用更难，因此混合相萃取盘可能需要比反相吸附剂稍多的洗脱溶剂体积。

体积指南：反相EZdisk滤器式萃取盘（SD）

注意：洗脱体积是作为一个范围提供的，应针对每种分析物进行优化：高密度（HD）萃取盘所需的体积会略小。

2.混合相萃取

下表列出了使用混合相吸附剂（反相和阳离子交换键合到同一载体上）的EZdisk滤器式萃取盘SPE方法的溶剂体积一般指南。活化和淋洗溶剂的顺序很常见，并且通常在不同的实验之间没有变化。最常用的洗脱溶剂是（二氯甲烷/异丙醇/氢氧化铵(78:20:2,v/v/v)，每日现配。替代洗脱溶剂包括甲醇/氢氧化铵或乙腈/氢氧化铵(98/2,v/v)。

体积指南：混合相 EZdisk滤器式萃取盘

注意：洗脱体积作为一个范围提供，应针对每种分析物进行优化；高密度（HD）萃取盘所需的体积会略小。

3.样品处理选项

萃取盘的密集颗粒堆积可防止样品在重力作用下自由流动。需要真空或正压来迫使液体通过EZdisk滤器式萃取盘。以下方法已被证明在通过萃取盘处理液体方面是成功的：

（1）真空

（2）正压

（3）自动化液体处理工作站

（1） 真空

几种不同的真空负压装置（如， Win12/24固相萃取装置； Extrapid固相萃取装置）通常用于使液体通过萃取盘。许多供应商都提供真空负压装置，通常一次可容纳12至24个萃取盘。接收试管放置在每个EZdisk滤器式萃取盘位置下方，以在每个步骤中收集液体。

真空建议：

Empore?EZdisk滤器式萃取盘（SD）在使用真空时通常需要-10--15 in Hg（-0.34到-0.51bar）真空度来处理血浆和血清等生物流体。高密度萃取盘需要更大真空度，约为-20 in Hg (-0.68 bar)。

一般指南是在所有步骤中将真空源打开至约-15 inHg (-0.51 bar)，但有两个例外：

1）在方法优化期间，在低真空（-5--7 inHg；-0.17至-0.24 bar）和高真空（约-17--20 in Hg；-0.58至-0.68 bar）下加载样品。如果分析物对吸附剂的亲和力较低，则可能需要在加载步骤期间更慢地通过吸附剂床，以产生足够的吸附。

2）在洗脱步骤中通常需要低真空，以防止在收集装置中飞溅。从MPC 吸附剂中洗脱时，较低的真空也可能是有益的，因为较慢的流速将允许有更多的时间来破坏离子相互作用（比反相相互作用更强）。

真空负压装置

（2）正压

正压固相萃取装置可以在手动模式下与EZdisk滤器式萃取盘一起使用。以这种方式，可以通过将注射器直接连接到EZdisk滤器式萃取盘来一次处理一个样品。空气被迫通过EZdisk滤器式萃取盘并置换液体。

适配器

注意：正压装置可用于处理液体样品。

（3）自动化液体处理工作站

自动化液体处理工作站（如LabTech Sepaths UP全自动柱-膜通用固相萃取系统）可用于自动化处理固相萃取过程。正压或真空用于推动液体通过EZdisk滤器式萃取盘，采用独特的方法（例如，柱塞、盖插入、密封板）。这些自动化系统与EZdisk滤器式萃取盘相结合，可以成为提高通量的理想组合。消除了人工移液错误和/或程序错误的可能性。

浓缩步骤

Empore?EZdisk滤器式萃取盘，膜片格式的设计允许使用较少的洗脱体积。通常可以减少浓缩步骤的耗时。通常采用两种浓缩步骤的方法：

1）两步洗脱：用少量有机溶剂洗脱。然后加入一定体积的水相液体，并保证所得溶液的组成与LC流动相兼容。

2）与流动相兼容的洗脱：使用具有足够有机含量的溶液进行洗脱，以解吸目标分析物，但也需保证与直接进样的LC流动相兼容。

注意：上面显示的方法只是示例。洗脱体积将根据萃取盘尺寸、物理/化学特性或分析物、分析物对所选吸附剂的亲和力和洗脱溶剂的强度而有所不同。

方法示例

下面列出了反相萃取和混合相萃取的一般方法。建议的方法可以在实验指南部分找到。使用CDS Empore?EZdisk滤器式萃取盘的方法的具体公开示例可在Empore?产品参考书目中找到。

混合相萃取

*样品 pH 值应至少低于pKa两个单位。使用0.1M或更低的离子强度缓冲液。

**替代洗脱溶剂：

正己烷/乙酸乙酯(50/50,v/v)

乙酸乙酯/氢氧化铵(98/2,v/v)

甲醇/氢氧化铵(98/2,v/v)

乙腈/氢氧化铵(98/2,v/v)

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