奶茶中茶多酚含量测定方法的优化
01
第一部分:引言
茶多酚是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚有抗衰老、缓解过敏、助消化、防辐射、护齿、养颜等功效,并在癌症、高血压、动脉硬化、高血糖、中风、血栓、哮喘、便秘、腹泻等疾病的治疗上也有积极的作用。因此,食品中茶多酚的含量和形态被越来越多的消费者关注。奶茶是将茶和奶混合的饮料,兼具牛奶和茶的双重营养。近年来,我国奶茶行业高速发展,热度持续上涨,大大小小的奶茶品牌随处可见,但是在质量上却参差不齐, 其中茶多酚含量作为衡量奶茶品质重要指标。GB/T 21733—2008《茶饮料》规定奶茶中茶多酚含量≥200mg/kg。
GB/T 21733—2008中采用酒石酸亚铁比色法测定奶茶中茶多酚含量,但是在实际操作中存在诸多困难。针对奶茶饮料、果汁茶饮料等较浑浊的样液,国标方法选取95%乙醇溶液作为沉淀剂,然而在实际 检测过程中发现在加入95%乙醇溶液后,蛋白质等杂质沉淀效果并不理想,滤纸过滤缓慢,滤液浑浊,背景吸光度高,无法进行准确测定。杜淑霞等[9]指出丙 酮有破乳和沉淀蛋白的作用,在加入一定量的盐酸后可促进其作用,缩短澄清时间,加快过滤速度。梁瑞婷等选用4%乙酸溶液作为沉淀剂,测定20种不同的奶茶饮料,大多奶茶饮料过滤速度快,滤液澄清。但是过量的酸会降低缓冲盐的缓冲效果,影响测定液的pH,导致测定结果偏低,且偏低的程度随着乙酸用量的增大而增大。试验在借鉴前人方法的基础上,以酒石酸亚铁比色法为基本方法,通过改变不同种类、不同剂量的沉淀剂优化前处理效果,提高奶茶中茶多酚含量的准确度。
02
水浴锅;
离心机;
分光光度计(UV-1500,上海有限公司)。
茶多酚(≥98%,上海源叶生物科技有限公司);
无水硫酸钠、丙酮、乙腈、盐酸、无水乙醇(均为分析纯)。
酒石酸亚铁溶液:称取0.1g硫酸亚铁(分析纯)和0.5g酒石酸钾钠(分析纯),用水溶解定容至100mL。
磷酸缓冲溶液:称取20.3g无水磷酸氢二钠(分析纯)用纯水溶解,称取1.36g无水磷酸二氢钾(分析纯)用纯水溶解,合并2种溶液并定容至1 000mL。
试样的制备
称取10g充分混匀的样液,加入8mL乙腈,加入0.5mL 1%盐酸,摇匀,静置10min,用水定容至25mL,按6000r/min离心5min。过滤,滤液备用。
03
精确量取2mL滤液于25mL容量瓶中,加入4mL水和5mL酒石酸亚铁溶液,充分摇匀,用磷酸盐缓冲溶液定容至刻度,用1cm比色皿,在波长540nm处,以试剂空白为参比,测定其吸光度A1。取等量的滤液于25mL容量瓶中,加入4mL水,用磷酸盐缓冲溶液定容至刻度,用1cm比色皿,在波长540nm处,以试剂空白为参比,测定其吸光度A2 。茶多酚含量按式
式中:X为样品中茶多酚的含量,mg/kg;A1为试样显色后的吸光度;A2 为试样底色的吸光度;V2为测定时吸取试样体积,mL;V1为试样处理时的定容体积,mL;M为取样量,g;1.957,用1cm比色杯,吸光度等于0.5时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
04
取10g样品,加入8mL乙腈和0.5mL1%的盐酸,能有效去除蛋白质的干扰,获得澄清的样品溶液。样品溶液加入酒石酸亚铁后,形成蓝紫色络合物,溶液显色明显。试验方法回收率在90%~111%之间,平行样相对标准偏为2.7%~4.4%,与GB/T 21733—2008相比,沉淀现象明显,过滤速度快,滤液澄清,背景吸光度低,有更好的准确性和重现性。优化的方法操作简便,能有效进行奶茶等茶饮料中茶多酚含量的测定。
05
UV-1500PC紫外可见分光光度计
仪器特点
*采用单片微机控制,128*64位液晶显示
*宽大的液晶显示器可显示多组数据
*巨大的内存空间,可存储多组数据和曲线
*自动调0、调100%功能
*波长自动调节
*光源自动切换,滤色片自动切换
*宽大样品池(5mm~100mm)
*具有最多十点标样建标准曲线测量功能
*可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量
*可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量
*可断电保存测量设置的标准曲线参数
*配备通用并行打印接口,可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线
*可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求
技术指标及基本参数
*波长范围:190~1100nm
*光谱带宽:2nm
*波长准确度:±0.5nm
*波长重现性:≤0.2nm
*透射比准确度: ±0.3% τ
*透射比重复性:0.15% τ
*杂散光:≤0.05% τ (220nm NaI,340nm
NaNO2)
*稳定性:0.001A/h(500nm预热后)
*测光方式:透过率、吸光度、浓度、能量
*波长调节:自动调节
*光度范围:-0.3~3A
*显示方式:128*64液晶
*检测器:进口硅光二极管
*光源:进口氘灯,进口钨灯
*电源:AC 220V/50Hz或110V/60Hz
*功率:120W
*仪器尺寸:480×350×220mm
06
上海有限公司(以下简称美析),是一家具有自主知识产权的高新技术企业,美析的创业理念“科技——因你改变”,并以此为企业宗旨,不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域,不断开发出先进的产品,使美析成为优质仪器资源的供应者。
美析主营光谱类仪器:可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、原子荧光光度计、ICP-AES、ICP-MS,生命科学仪器:超微量分光光度计、全自动核酸提取仪,目前,我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验,结合市场的最新实际需求,近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。
美析非常重视人才的引进和培养,人的因素是一个企业可持续发展的核心因素,所以美析充分尊重每一位员工,做到真正的“共建平台,实现自我”。为此美析建立了强大的培训团队,对在职员工进行全方位的培训,帮助员工制定职业生涯规划,以期公司和员工共同发展。同时美析以“家庭、敬业、学习”的职业操守启迪着员工,每一个美析人都以饱满的热情和专业的技能完,美呈现每一台仪器、服务每一位客户。对人才的重视和尊重使公司的各个环节都充满着严谨和激情,全新的设计理念、对高精度高参数的苛刻要求、应用范围的持续延伸,所有这些都在我们的产品先进性上得到了完美呈现;从原材料的严格验收,到各工艺流程的标准流水线作业,再到质检部门的严格出厂检测,美析人对生产各环节的苛刻要求使得公司建立起一套完善的过程质量控制系统,并在仪器的质量上得到有力体现。也因此使我们的产品受到国内外用户的一致好评。
美析的总部及生产基地设在上海,营销中心设在北京,并在上海、北京、江苏三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源,美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作,不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户,国内设有12家办事机构,度身定制符合您需求的应用解决方案,提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时,美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。
伴随着美析跻身全球品牌仪器行列步伐的加快,美析对自身的要求不断提高,同时我们也希望能得到社会各界的关爱和支持,让我们携手共同展望。科技,必将因你我而改变。
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