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pcr实验室出现了莫名其妙的污染，实验结果还总是假阳性？

来源：深圳市朗司医疗科技有限公司      分类：工作原理 2023-04-20 09:29:09 58阅读次数

PCR实验里Z怕出现什么问题？当然是辛苦做出来的结果假阳性了。

当PCR出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物/Mix/枪等等污染模板，然后一一排查，劳心劳累费时费力，有时还是找不到原因，简直要崩溃。

这里我觉得要延伸思考一下，这些试剂仪器到底为什么会被污染了呢？其实是核酸气溶胶污染。 


离心机离心/剧烈地摇动反应管/PCR开盖/吸样时及移液器的反复吸样等等，会产生空气与液体表面摩擦的，都会产生核酸气溶胶，也就是实验室里（或移液枪内）弥漫着含有长短不一核酸片段的小水珠或小颗粒，这些小颗粒沉降（打到）到空白样中导致Z后扩增出了条带。


可想而知，这些核酸小液滴还会落到实验台面/PCR仪/移液枪/枪头枪盒子等等地方，如果我们不注意，这些核酸小液滴就会日积月累地积聚，这样做实验就特别出现问题比如PCR假阳性。


那么我们平常做实验或者实验室管理上核酸气溶胶（也就是核酸小液滴）产生了巨大的污染究竟该怎么办呢？


大面积核酸污染清除操作方法：


（1）对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；

（2）对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）进行清洗，高温灭菌；

（3）待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；

（4）可请保洁员按照上述要求（1）（2）（3）连续清理三天；

（5）设计实验对照组（根据污染源基因片段），进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；


核酸气溶胶污染清除剂（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房间需要2盒可完成覆盖；其他设备及器件根据情况进行采购；

微信图片_20181116143105.jpg


大面积核酸气溶胶污染非常难以清除，若不立即采取清理，污染会更加牢固，长期释放污染核酸，导致实验室停工。


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