你的蛋白来自哪里,分离是否吃力?好用的protocol分享给你!
这是水晶吗?不,这是结晶!
1965 年 9 月 17 日,中国科学院上海生物化学研究所等单位密切合作,在世界范围内第一次实现了具有生物活力的结晶蛋白质的人工合成——结晶牛胰岛素,这是这一科研成果是人类探索生命奥秘的又一重大历史进程。
“复杂”的蛋白质
蛋白质合成之所以如此轰动一时,正是因为它本身非常复杂。蛋白质是由多种氨基酸通过肽键构成的高分子化合物,氨基和酰基之间或肽链间形成氢键,同一条或多条肽链的盘曲折叠,形成了蛋白质的复杂空间构象,也让蛋白质具有不同的生物活性,进而行使酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力等生物学功能。
但也因为复杂的构成,一点点细微的变化,就会导致生物活性的丧失。
实验室中不同来源的蛋白样品
“敏感”的蛋白质
在实验室里,这种敏感脆弱成了困扰科研人的大难题,无论蛋白样品来自组织、细胞还是细菌,都可能因为不同的处理条件引发蛋白质变性:
▲ 物理因素包括:加热、加压、脱水、搅拌、振荡、紫外线照射、超声等;
▲ 化学因素有:强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二烷基硫酸钠(SDS)等。
总之,蛋白质受不了一点小委屈,而且在蛋白质组研究中,无论后续采用什么样的分离或鉴定手段,蛋白质样品的制备都是关键。
纯化蛋白质核心
如果你问师兄,纯化蛋白质有什么注意点,最核心的注意点可以概括为两个字:低温
▲ 蛋白裂解要温和,操作过程要低温
▲ 蛋白离心要又快又稳,分离过程一定要用冷冻离心机
实验室中置于冰上的蛋白样品
处理蛋白的过程中,稳定的低温环境可以守护好样品。小 E 的离心机当仁不让,不仅能够快速降温,而且还能维持温度稳定。
以下两款不同的冷冻离心机,满足不同通量需求,为蛋白质样品创造舒适离心环境。
5425 R 小型高速冷冻离心机
蛋白快速分离超友好:
▲ 高速的离心力让分离高效 Max RCF 21,300 × g(15,060 rpm)
▲ 1.5-5 mL 离心管、冻存管、离心柱管离心均可靠
▲ 定速计时、升降速控制等功能让离心过程更充分
▲ 45° 固定离心角度让低浓度蛋白样品沉淀更集中、回收更高效
5910Ri 智能冷冻离心机
中到高通量蛋白样品必备:
▲ 动态压缩机制冷,显示温度即样品所在温度,确保蛋白活性最大化
▲ 通用转子、吊篮和适配器,无论是离心(浓缩)管、离心瓶和工作板,随便离
▲ 常用程序保存起来,一键启动, “常用参数”收藏起来,3 秒启动新离心程序
小 E 还提供了更多蛋白样品离心中的离心机选择,配套了使用文献和蛋白处理的 protocol,点击图片即可查看
除了蛋白处理,小 E 还提供了丰富的样品离心方案,核酸、病毒、血细胞……品类丰富,点击下方图片,即可查看不同应用方案
互动环节
除了稳定的低温环境,蛋白离心 protocol 中都有哪些需要高亮的知识点?一起来评论区和小E聊聊吧~
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