Copure EDTA专用柱||食品中乙二胺四乙酸二钠含量的测定-医疗器械网

Copure EDTA专用柱||食品中乙二胺四乙酸二钠含量的测定

来源：深圳逗点生物技术有限公司分类：应用方案 2024-04-19 17:30:09 70阅读次数

EDTA二钠（又称乙二胺四乙酸二钠，Disodium EDTA），是GB 2760允许使用的一种食品添加剂，其限量值分别为：饮料类（包装饮用水类除外）0.03 g/kg；果酱、蔬菜泥（酱）（番茄沙司除外）等0.07 g/kg；腌渍菜、蔬菜罐头、坚果与籽类罐头、八宝粥罐头、地瓜果脯等0.25 g/kg。
根据标准GB 5009.278-2016进行优化，使用EDTA强阴离子交换专用SPE小柱结合高效液相方法对橙汁、梨罐头、罐装八宝粥、鸡粉、玉米粉、西梅蜜饯、芒果干和腌制酸菜等八种基质中乙二胺四乙酸二钠进行检测，定量限回收率均在90%以上，方法简单易行。

一、样品前处理

与水互溶：橙汁
称取试样5g(精确至0.01g)，置于50 mL玻璃比色管中，加入25 mL水，涡旋混匀，超声提取20 min后，加水定容至50 mL。吸取5 mL上清液于15 mL离心管中，待络合。
不溶于水：梨罐头、罐装八宝粥、鸡粉、玉米粉、西梅蜜饯、芒果干
称取试样5 g(精确至0.01g)，置于50 mL离心管中，加入25 mL水，涡旋混匀，超声20 min，10000 r/min离心5 min，取上清液置于50 mL玻璃比色管中。剩余残渣重复提取一次，离心后合并上清液，加水定容至50 mL。吸取5 mL定容液于15 mL离心管中，待络合。
带油脂：腌制酸菜
称取试样5 g(精确至0.01g)，置于50 mL离心管中，加入25 mL水，涡旋混匀，超声20 min，10000 r/min离心5 min，取上清液置于50 mL玻璃比色管中。剩余残渣重复提取一次，离心后合并上清液，此时上层会有些许油脂，加水将分层面到50mL刻度线。往比色管中加入5mL正己烷，轻轻摇晃数下，静置分层后。吸取5 mL下层液于15 mL离心管中，待络合。
络合
向上述提取溶液中加入0.5 mL三氯化铁溶液，涡旋混匀1 min，超声20 min，10000 r/min离心5min，待净化。
注：三氯化铁溶液：称取0.54g三氯化铁（FeCl3.6H2O），溶于90 mL水中，加入0.10 mL盐酸（分析纯），转移到100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。

二、SPE净化

活化：5 mL甲醇
平衡：5 mL水
上样：将待净化液全部上样过柱
淋洗：依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗，抽干
洗脱：5 mL 7%甲酸甲醇水溶液（甲酸：甲醇：水=7:18:75）洗脱，抽干，收集洗脱液定容至5 mL，过亲水PTFE滤膜，供液相色谱仪测定。

三、仪器条件

设备：Thermo Scientific UltiMate 3000
色谱柱：CommaSil? C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：紫外检测器
流动相：甲醇：四丁基溴化铵-乙酸钠混合溶液(pH4.0) =15:85
流速：0.8 mL/min
柱温：35 ℃
进样体积：10 μL

四、实验图谱

图1 3ppm标准溶液乙二胺四乙酸二钠络合物液相色谱图

图2 八种基质加标叠加液相色谱图

五、实验结果

目标物	基质	加标浓度	回收率			平均回收率(%) n=3	RSD(%)
乙二胺四乙酸二钠	橙汁	0.03 g/kg	99.7	100.7	101.3	101	0.81
	罐头		98.5	98.8	96.9	98.1	1.05
	八宝粥		98.4	98.7	98.3	98.4	0.22
	鸡粉		87.0	88.1	88.3	87.8	0.83
	玉米粉		90.6	90.7	91.0	90.8	0.25
	芒果		95.2	94.5	94.2	94.6	0.56
	西梅		93.72	96.6	92.9	94.4	2.10
	酸菜		91.8	91.0	90.4	91.1	0.78

六、注意事项

6.1、试样加提取液后先将样品涡旋混匀后再超声。
6.2、加入三氯化铁络合前，先涡旋混匀后再超声
6.3、络合后玉米粉和鸡粉会产生大量沉淀，适当提高离心转速和时间，保证样液澄清，过柱时便于目标物的吸附。
6.4、离心后的络合液若不能及时过柱，可先转移出来，以免样液再变浑浊。
6.5、固相萃取时，整个过程控制好流速，尽量靠重力，若加压需要控制流速1滴/秒。
6.6、洗脱液配制时，需要注意甲酸的浓度及比例，7%甲酸甲醇水溶液（甲酸：甲醇：水=7:18:75），尽量不要用放置过久的甲酸，酸度不够会洗脱不完全。

七、订购信息

货号	描述	包装
COED6200	Copure乙二胺四乙酸二钠专用柱， 200mg，6mL	30支/盒
HC18536	CommaSil C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)	1根/盒
SDC-3000-D	多管涡旋混匀仪	1台/箱
BN24	^?24孔智能氮吹仪	1台/箱
ASF130-22-PTFE-HL	亲水PTFE针式过滤器，直径13 mm，孔径0.22 μm	100个/盒
SC2-1	2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425	100个/盒
V2-AL-N	2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425	100个/盒