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SEC分析神器Biozen dSEC—蛋白or多肽or寡核苷酸都能做(文末有惊喜)

来源:天津博纳艾杰尔科技有限公司      分类:工作原理 2024-04-10 16:00:10 65阅读次数



上回我们说到,Ti这种金属拥有很强的惰性,如果做成对应的色谱柱硬件,将非常适合于一些对金属离子敏感的化合物。(走在行业的前列——Ti与BioZen的故事)


今天我们将延续上次的故事,给大家聊一聊当您要做体积排阻色谱SEC的时候,Biozen这种钛合金的硬件,能为我们带来什么亮眼的好处呢?


首先,让我们情景再现一下:



进样叠加一蛋白质分析预充色谱柱比较





我们设计了全新的BioTi生物兼容硬件,帮助您节省花费在色谱柱预充上的漫长时间。

——Jason Anspach博士

资深科学家


对相同填料,不同柱管硬件的两根色谱柱进行比较,我们可以发现,传统不锈钢硬件的色谱柱会对蛋白(特别是等电点相对偏低的蛋白)产生一定的吸附作用,需要多次进样来预饱和色谱柱。而使用BioTi硬件的色谱柱,可以大大降低样品和色谱柱硬件之间的相互作用,迅速达到饱和点。


那么对于常见的PEEK生物相容性硬件来说,钛合金硬件有什么优势呢?BioTi的真正价值并不在于压力,而是与内径差异有关。实验室测试了一批色谱柱之后发现,BioTi内衬的色谱柱内径RSD值基本跟传统不锈钢管柱相当,但明显优于PEEK内衬的色谱柱内径的RSD值。这表明了什么呢?我们都知道内径为4.4mm的色谱柱与内径为4.6mm的色谱柱相比,当以相同的流速运行时,其线速度会有所不同,这可能就会导致保留时间的变化。



_

不锈钢

BioTi

PEEK

平均值

4.58

4.58

4.56

4.58

4.58

4.44

4.58

4.58

4.62

4.58

4.58

4.64

4.58

4.58

4.56

4.56

4.6

4.6

4.58

4.62

4.64

4.58

4.58

4.6

4.58

4.58

4.68

4.58

4.6

4.62

4.58

4.6

4.58

4.56

4.6

4.62

4.58

4.59

4.60

% RSD

0.17%

0.29%

1.31%

保留时间 % RSD

0.34%

0.59%

2.60%


除了BioTi硬件,Biozen dSEC还有另外两个技术加持。第一,借助高惰性热改性技术,使硅胶达到更低的孔隙体积,实现更好的稳定性和重现性。第二,采用了独有的亲水性二醇类键合表面,能够防止硅胶表面与蛋白质样品之间产生次级相互作用。



上述三种技能叠Buff,塑造了Biozen dSEC优异的性能。除了做单双抗时候优异的分离,在做ADC这类偶联了payload的化合物时,也表现出独特的优势。下图为Anti-HER2 mcMMAF在Biozen dSEC-2上做的分子大小变异体,可以看到就算不加有机溶剂,也依然可以得到比较良好的峰形。



当然,随着多肽和寡核苷酸药物的兴起,对于这两种新分子的质控要求也越来越完善,其中也有Biozen dSEC-2发挥作用的地方。


在CDE发布的《化学合成多肽药物药学研究技术指导原则(试行)》中,对于多肽的聚合物有明确的控制要求。


类别

描述

来源

聚合物

端基具有反应活性或为二硫键改变等引发肽聚合

合成或降解

选自表格 肽相关杂质的类别及来源


替尔泊肽聚合物分析液相色谱图


虽然我国目前并没有针对寡核苷酸药物的法规及指导原则,但是从FDA发布的源于寡核苷酸药物的CMC指南草案中可以看到,对于双链的寡核苷酸,需要使用两个正交的方法来评估单链和双链的纯度,以确定退火的完整性。


siRNA聚合物,双链,单链分析液相色谱图


哇,这么看来,Biozen dSEC-2适合的应用场景有很多啊,不过对于更大的生物分子,比如腺相关病毒AAV,那就得用我们的新产品Biozen dSEC-7啦~我们下期再见!


如需上述相关应用

可以扫码获取



                                               
                                               
                       
                                               

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最近更新:2023-09-18 16:20:36
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