Copure?固相萃取住上市十来年，不断会收到老师的使用反馈，我们的产品经理将合成着色剂的测试中遇到的问题和答案精心整理出来，欢迎各位老师多多反馈和沟通。

对于固体或者半固体样品：可以先加入2-5mL水，50℃水浴超声溶解或者混匀样品，使目标物在提取时更容易被提取出来，提高其提取率。
对于油脂类样品：在提取前可以加入20mL石油醚，涡旋1min，超声10min；油脂含量较多的可再次加入石油醚进行二次除油。这一步建议高速离心，8000r/min以上离心5min，石油醚尽可能弃干净。要注意：加入25mL乙醇氨水溶液后建议涡旋几分钟，使样品分散后再超声提取，因为上一步的高速离心会使样品结成团。

25mL乙醇氨水溶液作为第一次提取，之后可以少量多次提取，提取时可以对比加标的上清液和本底的上清液是否还有颜色差异。

目的是在于使上柱前样液的PH=6左右，满足WAX混合型弱阴离子交换固相萃取小柱对上样液的PH要求，保证小柱对合成着色剂有良好地吸附。对于酸性或者碱性特别强的样品，上样前需要额外注意PH值。

10mL 5%甲醇水溶液少量多次加入是为了更好复溶，在复溶时可以借助涡旋，超声的方式保证复溶完全，避免因复溶不完全造成回收率低情况。

靛蓝比较容易降解，储备液有效期比较短，建议重新配制储备液。另外因其有效期短，不建议和其它着色剂配成混标。

可以从两方面考虑：一方面是氨水的开封日期是否过久，二是洗脱液是否是现配现用。这两个方面的原因会影响洗脱液的PH值，导致PH值太低，洗脱不完全。

测试过程中发现，按照标准的乙酸铵（pH=9）作为复溶液，发现赤藓红的回收率较低，而选择用乙酸铵：甲醇=9:1（pH=9）作为复溶液可以提高赤藓红的回收率。

表2 不同复溶液复溶回收率比对

会对回收率有影响。

有的，尼龙滤膜会吸附着色剂。建议用亲水的PTFE滤膜（货号：SF130-22-PTFE-HL）。

我们可以分成3大部分去排查：提取，净化，上机

1、提取是否充分（本底提取后加标验证）：

①可以在提取后，“分2-3次共加入10mL 5%甲醇水溶液溶解，作为待净化液”，在这一步加标，然后净化，上机测试，排查是否是提取不充分引起回收率低问题。

② 若是提取不充分，可以从四个方面去确认：

1）提取前是否除油，或者是否加适量水水浴加热溶解或混匀样品；

2）提取液是否配错；

3）是否少量多次提取；

4）加入5%甲醇水复溶时是复溶完全。

2、过柱时损失：分成活化、上样、淋洗、洗脱、氮吹和复溶

①活化：小柱应先活化后上样，依次用6mL甲醇，6mL水活化，保持柱体湿润；

②上样：上样时是否掉色。若掉色需要关注上样液的PH值，一般PH=6左右。

③淋洗：淋洗时颜色是否掉下来。用甲醇淋洗时也会把其它杂质淋洗下来，并不是掉色。若是目标物被淋洗下来，需要关注淋洗液是否用错，也和上样液的PH值有关系。

④洗脱：洗脱是否充分，对于加标浓度不是特别高的，一般来说洗脱结束后小柱上基本看不到颜色，呈现出来的是填料本身的颜色。

若有颜色，要关注以下方面：

1）氨水是否开封已久，导致碱性不够；

2）洗脱液放置较久，氨水已挥发完；这两个因素会影响洗脱液的PH值，造成洗脱不完全。一般来说，洗脱液建议现配现用。

⑤氮吹：氮吹时不建议气流过大，氮吹至干即可，不建议氮吹时间过长/过干。

⑥复溶：建议用乙酸铵：甲醇=9:1（pH=9）作为复溶液，且采用超声和涡旋2种方式保证复溶完全。

 3、上机：

采集方法是否稳定，目标物之间是否有一定的分离度。