【Application Note】类肽和肽-类肽杂交体的自动合成-医疗器械网

【Application Note】类肽和肽-类肽杂交体的自动合成

来源：培安（中国）有限公司分类：动态 2023-11-16 11:34:25 38阅读次数

摘要

Liberty Blue? 自动微波肽合成仪能够快速高效地获取肽、类肽和类肽-肽杂交体
肽-类肽混合物 Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH₂ 在 2 小时内合成，纯度为 81%

简介

类肽是各种N-取代的甘氨酸的聚合物。虽然在结构上与肽相似（图1），但类肽对蛋白水解降解具有抗性，这归因于它们的酰胺键的完全取代。类肽在体内的稳定性提高，使其成为药物发现和开发的有吸引力的类肽靶标^1,2。

图1. 多肽和类肽的结构比较

类肽和类肽-肽杂化物通常通过“亚单体”过程合成，该过程包括两个步骤：(1) 用溴乙酸和 N,N' 二异丙基碳二亚胺(DIC) 酰化和 (2) 用单取代胺进行亲核置换（图2）^1,3。

图2. 典型的类肽合成

由于许多结构不同的单取代胺可商购获得，因此可以很容易地合成具有多种侧链的类肽^2,3。然而，类肽的常规合成每个残基可能需要长达三个小时¹。微波辐射已被证明可以显着减少合成时间，使类肽文库和类肽-肽杂交体的生产更加可行^1-3。

材料和方法

试剂

所有氨基酸均获自 CEM Corporation (Matthews, NC)，并含有以下侧链保护基团：Glu(OtBu) 和 Lys(Boc)。Oxyma Pure和Rink Amide ProTideTM LL 树脂购自 CEM Corporation (Matthews, NC)。溴乙酸、N,N二异丙基碳二亚胺 (DIC)、苄胺、β-丙氨酸叔丁酯盐酸盐、哌啶、三氟乙酸 (TFA)、3,6-二氧六环-1,8-辛二硫醇 (DODT)、三异丙基硅烷 (TIS) 和乙酸购自Sigma-Aldrich (St. Louis, MO)。N-Boc-1,4-二氨基丁烷和异丁胺购自 Alfa Aesar (Ward Hill, MA)。二氯甲烷 (DCM)、N,N 二甲基甲酰胺 (DMF) 和无水乙醚 (Et₂O) 购自 VWR (West Chester, PA)。HPLC 级水 (H₂O) 和 HPLC 级乙腈 (MeCN) 购自Fisher Scientific (Waltham, MA) 。

类肽-多肽杂交体合成：Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly- (NLys)-NH₂

使用 CEM Liberty Blue 自动微波肽合成仪在 Rink Amide ProTide LL 树脂（离子交换容量：0.18 meq/g ）上以 0.1 mmol 的规模制备类肽-肽混合物（图3）。对于类肽残基，用哌啶在 DMF 中进行脱保护，用溴乙酸和 DIC 进行酰化，并用 DMF 中的单取代胺进行亲核置换。对于肽残基，用哌啶在 DMF 中进行脱保护，并用 5 倍过量的 Fmoc-AA-OH、DMF 中的 DIC 和 DMF 中的 Oxyma Pure 进行偶联反应。使用具有 TFA/H₂O/TIS/DODT 的 CEM Razor 高通量肽切割系统进行切割。裂解后肽在无水乙醚中沉淀并冻干过夜。

图3. 目标类肽-多肽杂交体: Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH

类肽-多肽杂交体分析

在配备有 PDA 检测器的 Waters Acquity UPLC 系统上分析类肽-肽混合物，该检测器配备 Acquity UPLC BEH C8 色谱柱（1.7 mm 和 2.1 x 100 mm）。UPLC 系统连接到 Waters 3100 Single Quad MS 用于结构测定。在 Waters MassLynx 软件上进行峰分析。使用 (i) H₂O 和 (ii) MeCN 中的 0.1% TFA 梯度洗脱进行分离。

结果

在 Liberty Blue 自动微波肽合成仪上，Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly(NLys)-NH₂ 的微波增强 SPPS 产生了纯度为 81% 的目标肽（图4）。

图4.Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH2的UPLC色谱图

结论

CEM Liberty Blue 自动微波肽合成仪允许快速有效地获取肽、类肽和类肽-肽杂交体。微波增强的 SPPS 产生了纯度为 81% 的类肽-肽杂交体 Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH₂。

参考文献：

Olivos, H. J.; Alluri, P. G.; Reddy, M. M.; Salony, D.; Kodadek, T. Org. Lett. 2002, 4, 4057–4059.
Unciti-Broceta, A.; Diezmann, F.; Ou-Yang, C. Y.; Fara, M. A.; Bradley, M. Bioorg. Med. Chem. 2009, 17, 959–966.
Gorske, B. C.; Jewell, S. A.; Guerard, E. J.; Blackwell, H. E. Org. Lett.2005, 7, 1521–1524.

参与评论

登录后参与评论

全部评论(0条)

推荐阅读

【Application Note】类肽和肽-类肽杂交体的自动合成

Liberty Blue? 自动微波肽合成仪能够快速高效地获取肽、类肽和类肽-肽杂交体?。肽-类肽混合物 Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH2 在 2 小时内合成，纯度为 81%。

培安（中国）有限公司 111
2023-11-16
【Application Note】类肽和肽-类肽杂交体的自动合成

Liberty Blue? 自动微波肽合成仪能够快速高效地获取肽、类肽和类肽-肽杂交体?。肽-类肽混合物 Pro-Glu-(NLeu)-(NPhe)-Gly-(NLys)-NH2 在 2 小时内合成，纯度为 81%。

培安（中国）有限公司 72
2023-11-16
智能软实力：King&#39s AUTO实验室自动化的创新飞跃

智能软实力：King's AUTO实验室自动化的创新飞跃

 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司 0
2024-06-03
利用微流控系统和实时图像处理实现单细胞的弹性自动测量

细胞的力学特性与其生理状态和功能密切相关。微流控系统成为高通量细胞力学特性研究的强大工具。本文介绍了一种实时自动测量单细胞弹性模量的微流控系统。该系统集成了具有细胞收缩微通道的微流控芯片、压力泵、精密差压传感器和在线分析细胞变形的程序。

泰初科技（天津）有限公司 0
2024-06-01
直播 | 探索前沿半导体器件的PFIB自动化大面积逐层剥离和原位纳米探针技术

2024年6月12日15:00直播，深入探讨自动化大面积PFIB逐层剥离和原位纳米探针检测的创新方法。

泰思肯贸易（上海）有限公司 0
2024-05-29
【培训班】5月30日-31日寡核酸药物合成及其纯化工艺开发

5月30日-31日寡核酸药物合成及其纯化工艺开发

 苏州赛谱仪器有限公司 0
2024-05-21
交付现场 | 中科都菱自动化疫苗库

中科都菱自动化冷库应用----智能化疫苗库交付现场最新报道\x0a探索信息化方式保障疫苗储运安全

 安徽中科都菱商用电器股份有限公司 0
2024-05-21
试用体验邀请 | 锂电革新，精准测量：AKF-CAS6多工位全自动水分测定仪

试用体验邀请 | 锂电革新，精准测量：AKF-CAS6多工位全自动水分测定仪

 上海禾工科学仪器有限公司 0
2024-05-18
瑞士步琦合成生物学整体解决方案

步琦公司作为先进的仪器设备供应商，拥有丰富的产品线，在合成生物学方面也为用户在发酵产物的后处理提供完善的解决方案。

步琦实验室设备贸易（上海）有限公司 0
2024-05-16
2024第三届中国自动及智能在线无损检测技术论坛会议第一轮通知

2024第三届中国自动及智能在线无损检测技术论坛会议第一轮通知

 钢研纳克检测技术股份有限公司 0
2024-04-30