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别乱买！宝藏级种草系列之样品制备

来源：天津博纳艾杰尔科技有限公司分类：应用方案 2024-04-19 17:15:12 83阅读次数

“凡事预则立，不预则废”——《礼记·中庸》

在液相色谱实验中，样品基质中通常含有微粒或干扰化合物，从而为接下来的分析过程制造困难，更有可能损坏色谱系统或色谱柱。因此，正确的样品预处理方法的选择对于HPLC和GC分析结果的准确尤为重要。

本期，我们为大家汇总了#样品制备不同技术模式的选型指南，助力色谱实验升级打怪，战无不胜！

固相萃取（SPE）

固相萃取（SPE）是根据物理化学性质将化合物从混合物中除去的过程，是在HPLC或GC分析之前净化和浓缩样品的有效技术。该技术为目标分析物提供了目标选择性，适用于多种样品体积，可轻松实现高通量自动化，并通过快速简单的方法（活化、平衡、上样、淋洗、洗脱）完成。

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支撑液液萃取（SLE）

SLE与传统液液萃取相比，避免了乳化现象和手动分离两相液体的操作，简化了液-液萃取过程的产品。只需将您的含水样品加载到固体支持物上，并让其渗入吸附剂中。5分钟后，使用与液-液萃取相同的有机溶剂。目标分析物将分配到有机溶剂中，并从吸附剂中洗脱出来，留下磷脂、蛋白质和盐等污染物。

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磷脂去除（PLR）

磷脂已被证明会降低HPLC/UHPLC柱的寿命和灵敏度，并且还会导致离子抑制。磷脂存在于大多数生物分析样品中，包括全血和血浆。随着生物分析样品的应用日益增多，在LC-MS/MS分析前从样品中去除磷脂已成为准确分析的重要步骤。

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蛋白沉淀（PPT）

生物样品基质中的蛋白质对HPLC/UHPLC色谱柱寿命有显著影响，并可能干扰质谱检测器的灵敏度。蛋白沉淀是一种简单的样品制备技术，通常使用有机溶剂或盐从样品中去除蛋白质。

尽管有多种从血浆和组织中沉淀蛋白质的方法，但很少有方法能够在不转移过多样品的情况下从样品中重复且有效地去除蛋白质，因为这可能导致目标分析物回收率的损失。

理想的蛋白沉淀方法能够实现在尽可能少的样品转移的情况下持续去除蛋白质。

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QuEChERS

QuEChERS（快速、简单、廉价、有效、耐用和安全的缩写）是大多数实验室多残留农药检测常用的样品制备技术。在残留检测中，主要的挑战是从样品基质中去除天然存在的色素、脂肪、蜡和其他不需要的干扰，以达到农药检测和定量的下限。

传统液/液萃取的技术需要使用有害溶剂，并且极性农药的回收率低。

QuEChERS方法已被证明非常通用，适用于同时分析不同基质中的多种农药。各种各样的食品基质，从含水的、富含纤维的，到脂肪/油类食品，都可以使用不同的吸收剂混合物和一种技术进行相对简单的清理。

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β-葡萄糖苷酸酶去除

β-葡萄糖苷酸酶去除是指在水解后从样品中去除大的β-葡萄糖苷酸酶蛋白以获得更好分析结果的过程。实验室通常会对样品进行稀释后直接进样，但β-葡萄糖醛酸酶会对分析物的回收率造成干扰，例如降低灵敏度和高信噪比。

β-Gone?可在不到1分钟的时间内清除水解尿液中的β-葡萄糖苷酸酶，非常适合快速药物检测。

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免疫捕获：磁珠

免疫捕获磁珠通过亲和结合捕获链霉素或其他目标分析物，实现分离和纯化蛋白质和肽的目的。与传统的样品制备方法相比，磁珠提供了一种快速的解决方案，它最大限度地提高了与均匀颗粒的结合能力，从而在更短的时间内获得准确可靠的结果。

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N-糖净化

蛋白质糖基化是蛋白翻译后修饰(PTM)中最常见、结构最多样的一种修饰形式，对于维持糖蛋白的正常结构和功能发挥重要作用。目前，在已经上市的生物技术药物中有60%以上是糖蛋白，它们主要由哺乳动物细胞表达，如抗体、重组激素和酶等。糖基通过共价键与蛋白质中特定的氨基酸残基连接，有些已经被列入相应药物的关键质量属性。

蛋白质糖谱分析不是一项简单的工作，它涉及到复杂N-糖和O-糖分子的识别，大量经验与实例表明，亲水相互作用液相色谱法(HILIC)是一种成熟的分离和定量聚糖的分析方法。N-Glycan净化板采用HILIC固相萃取模式，高回收率微洗脱规格的标记释放N-聚糖，可去除标记试剂、盐或表面活性剂，简化处理过程并净化少量样品。

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N-Glycan净化板

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