参考QB/T 5715-2022高效液相色谱法测定发酵液中衣康酸含量
衣康酸（itaconicacid）又称甲叉丁二酸、亚甲基丁二酸，是世界上5大有机酸之一。由于其含不饱和双键，具有活泼的化学性质，能进行各种加成反应、聚合反应和酯化反应，是化学合成和化工生产的重要工业原料，在化纤、塑料、橡胶、医药、食品、合成树脂及表面活性剂领域具有广泛的应用。
本应用参照QB/T 5715-2022《发酵液中衣康酸的测定 高效液相色谱法》，采用C18色谱柱TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×25 cm，5μm）对衣康酸进行定量分析，本方法可满足上述行标中的定量要求。
① 衣康酸标准溶液（2 mg/mL）：准确称取20 mg衣康酸标准，用流动相溶解并定容至10 mL，此溶液衣康酸浓度为2 mg/mL，于4℃保存，有效期6个月。
② 衣康酸标准工作曲线溶液：使用上述2 mg/mL标准溶液，使用流动相逐级稀释至5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L。
③ 流动相：0.1%磷酸水溶液:甲醇=87:13 (体积比)
仪器：Thermo Ultimate 3000
色谱柱：TSKgel ODS-100V（4.6 mmI.D.×25 cm, 5 μm）
流速：0.8 mL/min
柱温：45℃
进样量：5 μL
检测器：UV@210nm
图1 约0.1mg/mL衣康酸溶液的色谱图
图2 衣康酸浓度-峰面积校正曲线
使用阴离子交换色谱法分离完整AAV衣壳和空AAV衣壳
采用SEC色谱柱测定人促红素中二聚体及高分子量物质
采用亲和色谱柱TSKgel Boronate-5PW测定单抗糖化比例
参照USP129修订案建立单抗的SEC-UHPLC分析方法
TSKgel色谱柱使用中的10大常见典型问题及解答
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