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创新2024｜CEPT技术革新，Gibco CultureCEPT添加剂重塑细胞存活新高度

来源：赛默飞世尔科技生命科学产品分类：技术参数 2024-04-23 10:45:06 66阅读次数

多年来，研究人员一直使用 Rho 激酶 (ROCK) 抑制剂（例如 Y-27632）来减少细胞在应激细胞培养处理步骤中的死亡，直到一种新技术被发明出来，可以提供更高的细胞存活率。

Gibco? CultureCEPT? 添加剂，技术转化自美国NIH 国家转化科学促进中心 (NCATS) 干细胞翻译实验室的研究成果[1]。这项突破性的研究，通过对 15,000 多种化合物的筛选，确定了一种小分子组合，协同工作以提供显着的细胞保护作用。Chroman1、emricasan、Polyamines和反式 ISRIB 分子（统称为 CEPT）被证明可以提高多能干细胞 (PSC) 传代、多种冻存细胞的复苏、基因编辑、单细胞克隆、拟胚体和类器官的形成中的细胞存活率。这种强大的分子组合可以抵御多种应激机制，这是 Y-27632 等单独的 ROCK 抑制剂无法实现的。

Gibco? CultureCEPT? 添加剂借助 CEPT 的强大功能，与 ThermoFisher Scientific 现有的培养基系统（例如 Gibco? Essential 8?、StemFlex?、StemScale? 和 Neurobasal? 培养基）配合使用，在广泛的应用中保证卓越的细胞活性。1000X 的浓度使用起来很方便，只需在实验中与培养基混合即可使用。

Gibco? CultureCEPT? 添加剂可提高 PSC 冻存的细胞存活率

图 1. 冷冻保存的人 iPSC (A) 和人胚胎干细胞 (ESC) (B) 在含有 Y-27632 或 CultureCEPT 添加剂的 Essential 8 培养基（货号 A1517001）中复苏培养。 24 小时后，用 Invitrogen? Vybrant? DyeCycle? Green Stain（货号 V35004）对细胞进行染色并定量。

Gibco? CultureCEPT? 添加剂可促进健康的球状体形成

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图 2. 将冷冻保存的人 iPSC 解冻并铺板于含有 CultureCEPT 添加剂和 Y-27632 或 DMSO 对照的圆底 96 孔板的 StemScale 培养基中。 24小时后评估球体形成。

Gibco? CultureCEPT? 添加剂提高冷冻保存的原代小鼠皮质神经元的存活率，从而在培养期间扩增得到更多的细胞数量

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图 3. 冷冻保存的 Gibco? 原代小鼠皮质神经元（货号 A15586）在 Gibco? B-27? Plus 神经元培养系统的 96 孔板中解冻并复苏培养。 (A) 解冻后的前 24 小时内添加了 CultureCEPT 添加剂。在培养物中第14天和第25天对HuC/HuD阳性细胞进行计数。(B) 使用或不使用 CultureCEPT 添加剂解冻的神经元图像示例，对 Map2（绿色）、HuC/HuD（红色）和 DAPI（蓝色）进行染色。

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参考文献（向上滑动查看更多）

1. Chen Y, Tristan CA, Chen L, et al. A versatile polypharmacology platform promotes cytoprotection and viability of human pluripotent and differentiated cells. Nat Methods. 2021 May;18(5):528–541. doi: 10.1038/s41592-021-01126-2. Epub 2021 May 3. PMID: 33941937; PMCID: PMC8314867. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33941937/.

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