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创新2024 | 肿瘤免疫治疗革命性进展：赛默飞助推精准医疗新篇章

来源：赛默飞世尔科技生命科学产品分类：产品评测 2024-04-28 17:15:07 84阅读次数

人类自几千年前就开始了与肿瘤旷日持久的较量。进入现代社会以来，肿瘤治疗已从传统医学逐步转移到了现代医学的阵地，继手术、放疗、化疗和靶向治疗之后，免疫治疗目前异常火热。肿瘤免疫治疗作为第4类抗肿瘤治疗方法已被证明对多种肿瘤具有显著临床疗效及优势，已逐渐成为肿瘤综合治疗的重要手段，并且显示出良好的应用前景。

什么是肿瘤免疫治疗？

肿瘤免疫治疗( cancer immunotherapy)是通过主动或被动的方法，增强抗肿瘤免疫应答、打破肿瘤的免疫抑制，激活体内免疫细胞作用，从而杀死肿瘤细胞的治疗方法。包括：免疫调节剂(非特异性)疗法、肿瘤疫苗(主动免疫)、过继性免疫治疗(被动免疫)和免疫检查点抑制剂疗法( immune checkpoint inhibitors ，ICIs )，后者在2018年获得了诺贝尔医学奖，是今天想重点解读的一种方法，也是目前肿瘤免疫治疗领域中最被看好的方向。

免疫检查点是啥呢？

简单地说，免疫检查点Immune checkpoints (ICPs)作为人体免疫系统的“刹车系统”，能防止免疫系统不加选择地攻击细胞。ICPs由成对的受体配体分子组成，对免疫防御、监视、调节和自我耐受发挥抑制或刺激作用。然而，狡猾的肿瘤细胞可通过刺激免疫检查点保护自己免受攻击形成免疫逃逸。科学家们通过找到免疫检查点，并设计免疫检查点抑制剂，将免疫检查点“封闭”，来增强免疫细胞识别和杀伤肿瘤细胞的能力，实现免疫系统对肿瘤的杀伤进而清除肿瘤细胞。

免疫检查点有哪些呢？

最著名的免疫检查点当属PD-1与CTLA-4，此外多种T细胞免疫应答、固有免疫的NK细胞免疫检查点及B7家族等等多种免疫检查点被研究人员不断发现。

免疫检查点的检测方法有哪些呢？

目前常用的一些方法包括应用流式细胞术、免疫组化以及可溶性蛋白检测等。

可溶性免疫检查点的定量检测是应用ELISA和基于Luminex方法的多因子检测方法对肿瘤患者血清、血浆中可溶性免疫检查点进行定量检测。

在肿瘤免疫治疗中检测可溶性免疫检查点的优势

首先从检测样本来说，血液属于非侵入性样本，比实体肿瘤的取材更容易获得，并可用于对生物标志物在不同时间点的连续监测。受益于对血液样本生物标志物检测技术的进步，我们现在可以通过血液中肿瘤相关标志物的检测更好地了解有关肿瘤诊断、治疗和预后的各种信息。

在肿瘤免疫治疗中检测可溶性免疫检查点的意义

免疫检查点（ICPs）在免疫稳态中发挥核心作用，这是由效应免疫细胞表面的刺激性和抑制性ICPs 之间的精确平衡维持的。ICPs可在体内和体外以细胞膜上（mICP）和可溶性形式（sICP）存在。恶性细胞和肿瘤免疫微环境(TIME)中的免疫细胞，其抑制性和刺激性mICPs之间明显失衡。因此阻断抑制性mICPs已成为肿瘤治疗的一个巨大突破。而sICP在健康及疾病中的起源、结构、产生调控和生物学功能已经被证明有非常重要的意义。

可溶性免疫检查点的来源

sICPs可通过mRNA剪接和分泌或蛋白酶介导的mICPs脱落产生。以PD-L1为例，sPD-L1可在血液中检测到， sPD-L1可以来源于不同的形式，包括切割水解，分泌的剪接变体和外泌体，所以肿瘤并不是sPD-L1的唯一来源。多项研究表明，在细胞因子和LPS存在的情况下，sPD-L1也可以从抗原提呈细胞如髓样树突状细胞中分泌。由于sICPs存在于血液中，它们可以形成循环免疫调节系统。

可溶性免疫检查点的生物学功能

sICPs在正向和负向免疫调节中发挥作用，其在外周血中的变化及其水平可能影响肿瘤的发展、预后和治疗。

可以作为肿瘤患者预后或治疗反应的生物标志物和/或预测因子
多种sICPs的血浆或血清水平包括sPD-L1、sPD-1、slg -3、sTIM-3、sCTLA-4、sHVEM、sCD80、sCD86、sCD27、sCD40和sBTLA在各种类型肿瘤患者中显著升高，这些sICPs被作为实体肿瘤如非小细胞肺癌、胃癌、结肠癌和宫颈癌的预后标志物。在包括手术、放射治疗、靶向治疗和免疫治疗等治疗后，sCIPs水平的变化表明它们可用来作为预测治疗疗效的生物标志物。
sICPs在肿瘤患者体内具有生物活性
越来越多的研究发现sICPs具有生物学功能，包括:(1)调节机体抗细菌的免疫；(2)与其mICP配体相互作用以正向或负向调节免疫反应；(3)与其mICP配体竞争结合ICP阻断抗体，从而降低ICP阻断治疗的疗效形成耐药；(4）另一方面有研究表明，体外和体内的sPD-1能够结合其膜结合配体(mPD-L1和mPD-L2)来阻断mPD-1/mPD-L1/mPD-L2的相互作用，从而恢复T细胞免疫。
更多的免疫检查点网络平衡机制
免疫稳态是一个精密调控的网络，抑制性和刺激性ICPs之间的失衡会导致免疫调控在肿瘤发展过程中失效。抑制性ICPs的增加是肿瘤免疫逃逸的主要原因。肿瘤细胞表面高水平的抑制性ICPs是肿瘤免疫微环境(TIME)的一个标志，它被多种类型的先天和适应性免疫细胞浸润。
单独的PD-1/PD-L1阻断治疗在很大比例的患者中未获得最佳结果。除了PD-1/PD-L1外，其他刺激和抑制分子也参与免疫调节。这些分子的各种形式，包括可溶性分子、外泌体相关分子和膜相关分子，在肿瘤微环境中发挥作用。例如，sCTLA-4与APC上的共刺激配体B7结合，并阻止B7与T细胞上的CD28结合，从而抑制T细胞功能。再如，研究发现sCD86可以与CTLA-4结合并向T淋巴细胞传递负信号。sB7-H3不仅显著抑制T细胞增殖，还通过上调TLR4的表达激活NF-κB信号通路，诱导IL-8和VEGF表达，从而促进新生血管形成和癌细胞侵袭转移。
因此对肿瘤中多种抑制和刺激分子进行进一步的研究，包括研究这些分子的各种形式、它们的复杂相互作用以及它们在肿瘤进展过程中的浓度变化十分必要。
综上所述，科学家们正在对肿瘤患者外周循环中sICPs的水平发生改变的临床意义不断探索，更好地理解sICPs网络的潜在机制可以为开发肿瘤免疫疗法的新策略奠定基础。

检测可溶性免疫检查点的优质工具

赛默飞世尔旗下Invitrogen^TM拥有多款基于Luminex多因子检测技术的试剂盒，可用于检测可溶性免疫检查点。其中包括

Immuno-Oncology Checkpoint 14-Plex Human ProcartaPlex? Panel 1：

主要用于检测T细胞免疫相关指标(共刺激/共抑制)

Immuno-Oncology Checkpoint 14-Plex Human ProcartaPlex? Panel 2：

主要是针对NK细胞固有免疫反应的相关检测。

Immuno-Oncology Checkpoint 9-Plex Human ProcartaPlex? Panel 3：

主要针对 B7家族等免疫检查点的检测

而且，这三组免疫检查点指标可在一个37因子的试剂盒中同时检测。

Invitrogen? Immune Checkpoint 37-Plex Human ProcartaPlex Panel

货号：EPX37-15846-901

（点击看大图）

此外，以上列出的预混即用型免疫检查点检测试剂盒还可以与其他诸如炎症因子、趋化因子等生物标志物进行灵活组合，将检测指标进一步扩充，从而更加高效地利用有限的血液样本对更多的指标进行监测。

ProcartaPlex 多因子检测试剂盒的特点

超过90%的ProcartaPlex检测panel可以相互组合，具有非常好的扩展性

?所有ProcartaPlex Panel均单独经过了针对特异性的、内源性的天然蛋白检测的测试

?拥有市面上较大通量的多因子检测panel的试剂盒，可对多达80种分析物靶标进行定量检测（货号：EPX800-10080-901）

ProcartaPlex 多因子检测试剂盒的优势

?实验结果特异性高，ProcartaPlex 与 ELISA两者结果高度相关 (R2 = 0.9)，不同平台的实验可以关联检测

?能从同一份样本中同时分析多至80种蛋白分析物（应用Luminex? MAGPIX? 检测系统分析多至50种因子)，多种panel可灵活组合

?所需样本量较少：需要25 μL血清或血浆/孔, 50 μL/孔细胞培养上清液

?提供免费分析软件

正如著名的免疫学家、美国国家科学院院士，耶鲁大学医学院免疫学教授陈列平博士在一次肿瘤免疫治疗论坛上所说的那样，“我们现在有了一个很好的开头。虽然我们知道了很多东西，但还有很多未知，等待我们去探索。”在肿瘤免疫治疗的研究和发展之路上，研究者们已经有了很多发现，并逐渐摸索出更多的、日趋成熟的治疗和检测方法，这些都是肿瘤免疫治疗不断前行的基石，人类正在攻克肿瘤的道路上不断前行，胜利的那一天也许并不遥远了。

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