基于液-质联用技术的合成生物学高通量筛选分析
作为21世纪新兴的交叉学科,合成生物学以工程化的设计理念,对生物体进行设计、改造、重新合成,并被越来越多地应用于生物医药、能源环境、食品农业、先进材料等行业。合成生物学研究中,会产生数量庞大的待测样本,使实验室承受前所未有的压力,亟需开发高通量自动化的分析检测方法,来及时高效地获取分析数据结果。
今天,小编给大家介绍一种高通量在线样品前处理和分析解决方案,该方案实现了生物合成目标分子的快速定性、定量分析。
Xevo TQ系列质谱
ACQUITY UPLC色谱泵
智达双臂高通量低残留进样系统
MassLynx 4.2数据采集处理软件
图1. 基于液-质联用技术的合成生物学高通量筛选分析系统。
在生物合成过程中,需要分别对起始底物(236 Da)和终产物(252 Da)的含量进行测定,以确定生物合成转化率,筛选最佳的合成条件。
UPLC实验条件:
色谱泵:
ACQUITY UPLC× 2
色谱柱:
ACQUITY UPLC BEH C18 VanGuard(2.1×5mm, 1.7 μm)P/N:186003975
流速:
0.6 mL/min
流动相A:
0.1%甲酸水
流动相B:
乙腈
色谱泵A:
流动相A-B = 98-2
色谱泵B:
流动相A-B = 30-70
MS条件:
仪器:
Xevo TQ 系列质谱
离子化模式:
ESI+
离子源温度:
150 ℃
去溶剂气温度:
500 ℃
去溶剂气流速:
1000 L/h
锥孔电压:
30 V
数据采集模式:
MS Scan(50-650 Da)
使用Waters Xevo TQ系列质谱和ACQUITY UPLC色谱泵系统,搭载智达双臂高通量低残留进样系统,采用双臂双柱模式对生物合成样品的起始反应底物(236 Da)和终产物(252 Da)的含量进行测定,实现20 s分析一个样品,为研究提供高效、准确的数据结果。
图2 . 双臂双柱交替模式高通量分析连接示意图。
通过对实验条件等进行优化后,实现20 s分析一个样品,具有通量高、灵敏度高、残留低、重复性好的特点。
(左右滑动查看)
超高效液相色谱串联质谱技术,搭载智达双臂高通量低残留进样系统,液态样品可直接进样,自动完成分析报告;
该系统实现样品在线除盐、富集、目标物分离和质谱检测一体化、自动化,可减少人为误差,保证结果一致性;
双柱并联的方式,高效利用进样与液质分析时间,只需很短的样品前处理、分析时间,达到更高的灵敏度,实现生物学高通量筛选分析。
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