Izon science 推出新的 qEV 20 nm 系列，让您可以进一步进入尺寸范围的小端，并分离出比以往更多的小颗粒。

EV 领域的研究人员对新发现细胞外纳米和超粒exomeres and supermeres（亚 EV 尺寸范围内的非囊泡颗粒）越来越感兴趣。除此之外，针对最小病毒（例如用于基因治疗的腺相关病毒（AAV））的研究正在获得巨大的关注。这两种应用都围绕低于我们 qEV 色谱柱当前理想隔离范围的颗粒。这就是我们开发新系列色谱柱的原因：qEV 20 nm 系列。新产品不仅是渐进式的改进，而且标志着我们进入以前未知领域的入。顾名思义，它们经过优化，可分离小至 20 nm 的微小颗粒，开辟了颗粒分离的全新世界。

最令人感兴趣的是 20 nm 系列色谱柱比现有 35 nm 系列色谱柱更有效地分离较小颗粒的能力。为了研究这一点，我们使用已知尺寸的羧化聚苯乙烯颗粒 (CPC) 作为样品，并将它们分离到相应色谱柱类型的完全纯化收集体积 (PCV) 中。顾名思义，20 nm 系列色谱柱分离出更多 20 nm 尺寸范围内的颗粒（CPC24；p<0.05）。对于平均尺寸为 50 nm（CPC50s；p<0.05）和 70 nm（CPC70s；p<0.05）但不是 100 nm（CP100s）的颗粒也是如此，这表明尺寸小于 100 nm 的颗粒的回收率有所提高。

因此，虽然 qEV 20 nm 系列色谱柱特别针对那些需要分离 20-35 nm 尺寸范围内的颗粒（例如外泌体和 AAV）的人，但它们也对那些希望更广泛地富集小型 EV 的人有所帮助。

图 1. 使用 qEV 20 nm 和 35 nm 系列色谱柱回收不同尺寸的颗粒。四种尺寸的羧化聚苯乙烯颗粒 (CPC) 通过 qEVoriginal 20 nm 或 35 nm 柱并收集在完全纯化的收集体积 (PCV) 中。使用光密度测定回收百分比。n = 3。数据显示平均值±标准误差。通过Mann–Whitney test进行分析。* p < 0.05

如图 2 所示，20 nm 色谱柱分离的颗粒数量是 35 nm (p<0.05) 和 70 nm (p<0.01) 系列色谱柱分离的颗粒数量的两倍多，至少在比较默认 PCV（设定的收集体积）时是这样。这意味着，如果您想以更高的效率分离更小的颗粒，而且如果 EV 产量是您的首要任务，那么 20 nm 色谱柱就是一个不错的选择。但产量的增加是否需要付出代价？

图 2. 通过 20 nm、35 nm 和 70 nm 系列色谱柱在默认 PCV 中分离出的 EV 和类似尺寸颗粒的浓度。使用 Exoid 测量颗粒。n = 13-16。数据显示平均值±标准误差。Kruskal-Wallis 及Dunn 的事后检验进行了分析。* p < 0.05，** p <0.01

为了向您介绍该色谱柱及其洗脱曲线，我们绘制了 qEVoriginal 20 nm 洗脱曲线以及现有的 35 nm 和 70 nm 系列色谱柱（图 3）。在这里您可以看到，与 35 nm 和 70 nm 色谱柱相比，20 nm 色谱柱的 PCV 中有一个新的蛋白质“洗脱峰”。所有 qEV 色谱柱尺寸均存在这种情况。这个“峰值”可能代表了该系列色谱柱部分设计用于分离的外粒和超粒。我们目前正在努力查明情况是否确实如此。

图 3. 20 nm、35 nm Gen 2 和 70 nm Gen 2 系列 qEVoriginal 色谱柱的洗脱曲线。使用 Exoid 测量颗粒浓度，并使用 (BCA) 测定法测量蛋白质浓度。颗粒浓度表示为平均值±标准误差，而回收的蛋白质百分比则使用平均值来描述。每个列系列 n=3。

无论蛋白洗脱峰的身份如何，图 4 表明，与 35 nm (p<0.001) 和 70 nm (p<0.0001) 系列相比，这确实导致默认 PCV 中蛋白质的增加。虽然这非常重要，但也很有限。默认 PCV 中仅存在原始血浆样品总蛋白的 6%。

图 4. PCV 和 EV 中分离出的血浆蛋白质百分比。使用BCA测量蛋白质浓度。n = 13-16。数据显示平均值±标准误差。Kruskal-Wallis 及 Dunn 的事后检验进行了分析。*** p < 0.001, **** p<0.0001

与 35 nm (p<0.01) 和 70 nm (p<0.01) 系列色谱柱相比，20 nm 色谱柱颗粒产量的增加确实导致纯度降低（图 5）。然而，纯度的下降仍然使 qEV 20 nm 系列领先于超速离心、密度梯度超速离心和沉淀，其中血浆/血清文献比较研究的纯度平均在 1e+08 范围内。1-5 20 nm 色谱柱也比我们的 Legacy 色谱柱更纯净，尤其是 35 nm 系列的 Legacy 色谱柱。因此，虽然与 Gen 2 / 35 nm 和 70 nm 系列色谱柱相比纯度有所下降，但 20 nm 系列色谱柱的性能仍然优于其他方法

图 5. 20 nm、35 nm 和 70 nm 系列色谱柱的默认纯化收集体积的纯度。Exoid 用于测量颗粒数量，BCA 测定用于测量蛋白质浓度。数据为平均值±标准误差，n = 13-16。Kruskal-Wallis及Dunn 的事后检验进行了分析。** p < 0.01

Izon Science 的 qEV 20 nm 系列色谱柱标志着颗粒分离领域的重大进步，特别是对于最小的细胞外囊泡、外泌体等小颗粒和腺相关病毒等小病毒。这项创新不仅扩展了纳米颗粒研究的可能性界限，而且还维护了 qEV 系列闻名的高纯度标准。借助这些色谱柱，研究人员现在可以探索以前无法进入的纳米级世界领域，从而增强诊断和治疗领域新发现的潜力。qEV 20 nm 系列色谱柱现已提供 qEVsingle、qEVoriginal、qEV1、qEV2 和 qEV10 尺寸，qEV100 即将推出。请注意，首先，随着产量的增加以满足需求，不同尺寸的色谱柱将有不同的交货时间。欢迎垂询。